ACL-4medium（serum-free）DMEM/F12（1:1）:Ham'sF12/DMEMedium（DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES，withNEAAMedium）0.02mg/ml胰島素＋0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白＋25nM亞砷酸鈉＋50nM氫化可的松＋1ng/mlEGF＋0.01mM乙酰胺＋0.01mM磷酸乙醇胺＋100pM三碘甲腺原氨酸＋0.5%（w/v）牛血清白蛋白＋10mMHEPES＋0.5mM丙酮酸鈉＋2mML-谷氨酰胺1）收貨前根據(jù)說明書培養(yǎng)條件，提前準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)所需材料。
2）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
3）收貨后沒有外觀損壞的情況下用75%酒精消毒后將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h等待細(xì)胞穩(wěn)定。
4）細(xì)胞穩(wěn)定后在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，判斷細(xì)胞的密度并清晰拍照200倍400倍照片最少2張記錄反饋細(xì)胞狀態(tài)以防出現(xiàn)售后作為證據(jù)，沒有照片和反饋默認(rèn)接受細(xì)胞質(zhì)量沒有問題。

備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)密度達(dá)到80%左右，?傳代比例前幾次都按照1:2傳代，傳代后一個(gè)倍增周期后可以長成2瓶80%左右密度的細(xì)胞時(shí)，凍存其中一瓶成1個(gè)1ml的凍存管當(dāng)種子細(xì)胞保存，另外一份長滿的細(xì)胞繼續(xù)1:2傳代，反復(fù)操作后凍存細(xì)胞種子大約3個(gè)以上。后續(xù)根據(jù)細(xì)胞倍增效率和密度可以適當(dāng)擴(kuò)大傳代比例做實(shí)驗(yàn)。

傳代比例：
1個(gè)T25瓶傳2個(gè)6cm的培養(yǎng)皿或者2個(gè)T25瓶相當(dāng)于1:2
1個(gè)T25瓶傳1個(gè)10cm的培養(yǎng)皿或者1個(gè)T75瓶相當(dāng)于1:3